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              技術文章/ TECHNICAL ARTICLES

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              熒光顯微鏡及熒光數碼成像拍照的選擇及注意事項

              時間:2021-08-10      瀏覽次數:2434

              熒光顯微鏡以及熒光拍照相機(顯微鏡相機)

              熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體,使之受激發后而產生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于物,醫學等領域等

              熒光顯微鏡般分為透射和落射式兩種類型。

              a.透射式激發光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使發光不進入物鏡,而使熒光進入物鏡。它在低倍情況下明亮,而高怕僅暗,在注漫和淘中時,較誰操作,尤以低倍的照明被圍準于確定,但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

              b.落射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微統多為落射式,光源來自被檢動依的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不適明的被檢物休體都適用。由于物確起了聚光接的作用,不僅便于操作,而且從低倍到高倍,可以實現整個視場的均勻照明。

              (2)熒光鏡檢術的注意事項

              a.激發光長時間的照射,會發生光的衰減和淬滅現象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應用擋板遮蓋發光。

              b.作油鏡觀察時,應用無熒光鏡油"。

              c.做熒光實驗,普遍熒光比較弱,應在較暗的室內進行。電源可裝穩壓器,否則電壓不穩不僅會降低汞燈的壽命,也會影響效果,目前新研究領域都會用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交FISH)等。

              熒光拍攝通常需要使用制冷型CCD(成像系統相機),因為制冷CCD可以減少背景噪聲,對弱熒光信號采集很有好處,特別是像單分子成像。采集強光信號不一定要用制冷CCD,可使用黑白相機,彩色相機不適合熒光采集,因為其感光度低、分辨率也低,除非熒光信號很高,對分辯率要求不高或者使用雙通道濾色片時才適合用彩色相機。

              熒光顯微鏡可以用啟步BM1000Z 2000Z  BM4000D BM3000D,進口可使用奧林巴斯BX53、BX43、CKX53。尼康NI、CI系列等都可以,相機也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都是不錯的選擇。


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